主要技术内容
6 样品制备
取具有代表性样品200 g,用四分法将试样缩分至100 g,测试前,取样品100g,置于60℃烘箱中干燥5h以上,然后取出样品,冷却至室温后用高速万能粉碎机粉碎,置于样品袋备用。
7 分析步骤
7.1 试样提取
精确称取1.0g(精确到0.0001g)粉碎的枸杞样于100mL离心管中,加70%(V甲醇/V水)甲醇水溶液50mL,摇匀,放置超声波清洗器中超声提取50min(每15min震摇1次),取出后在4000r/min转速下离心10min,上清液过0.45μm微孔滤膜过滤,供高效液相色谱仪测定。
7.2 高效液相参考条件
a) 色谱柱:Hypersil GOLD C18柱250mm*4.6mm,5.0μm,或相当者;
b) 柱温:30℃;
c) 流动相:A:甲醇,B:4%甲酸溶液,A:B=40%:60%;
d) 流速:1.0mL/min;
e) 波长:360nm;
f) 进样量:10μL。
7.3 标准曲线的绘制
用70%的甲醇溶液将芦丁标准溶液逐级稀释得到浓度为0、5、10、50、100、200μg/mL的标准工作溶液(见表1),依次由低到高进样检测,质量浓度X(μg/mL)为横坐标,以响应值(峰面积)Y为纵坐标进行线性回归,得到标准曲线回归方程。
表1 标准工作溶液
项目 标准溶液(母液) 标准溶液 1 2 3 4 5 6 7
芦丁 1mg/mL 工作标准溶液浓度μg/mL) 0 5 10 20 50 100 200
移取标准溶液体积/mL 0 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 2.00
7.4 测定
待测液中芦丁的响应值应在标准曲线范围内,超过线性范围则应稀释后再进样分析,同时做空白实验。
适用范围
本标准规定了高效液相色谱法测定枸杞中芦丁的原理、试剂、仪器和设备、样品制备、分析步骤、数据处理和精密度。
本标准适用于枸杞干果中芦丁的测定。
是否包含专利
否