主要技术内容
前 言
1 范围
2 规范性引用文件
3 术语和定义
4 一般要求
5 细胞样本的抽样方式和取样量
6 RNA提取
7 反转录
8 中间样本的保存与效期验证
9 检测靶标基因和内参基因的选择与对应引物和探针的设计
10 定量PCR反应的程序设计
11 检出限
12 检测对照的设置
13 结果判定
14 检测方法的验证
附 录 A(资料性)RNA提取方法的性能评价 核酸产量/纯度
附 录 B(资料性)RNA提取方法的性能评价 完整性:电泳检测
附 录 C(资料性)RNA提取方法的性能评价 完整性:加标定量PCR方法
附 录 D(资料性)残留基因组DNA评价
附 录 E(资料性)反转录效率评价
附 录 F(资料性)中间样本保存条件与与效期的验证
附 录 G(资料性)多能干细胞残留检测靶标基因示例
附 录 H(资料性)检出限确立的研究方案
参考文献
适用范围
本文件规定了分化细胞中残留多能干细胞检测的术语定义,一般要求, 以及细胞样本的抽样方式和取样量、RNA提取、反转录、中间样本的保存与效期验证、检测靶标基因和内参基因的选择与对应引物和探针的设计、检测对照、定量PCR反应程序设计、结果判定、检测方法验证中的相关要求。
本标准适用于多能干细胞分化细胞中残留多能干细胞检测TaqMan探针实时荧光定量PCR方法的开发与验证。
是否包含专利
否