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ICS01

团体标准

T/DALN 043—2026

牛奶中致敏原快速检测电化学传感器法

2026-05-26发布2026-06-11实施

辽宁省奶业协会发布

现行 T/DALN 043—2026

牛奶中致敏原快速检测电化学传感器法

公布日期：2026-05-26 发布日期：2026-05-26 实施日期：2026-06-11

所属团体：辽宁省奶业协会标准发布公告

分类信息

国际标准分类 01 综合、术语学、标准化、文献 -> 01.020 术语学(原则和协调配合)

中国标准分类 -

国民经济分类 A 农、林、牧、渔业 -> A01 农业 -> A019 其他农业

研制信息

起草单位辽宁省奶业协会沈阳农业大学鞍钢实业集团乳业有限公司

起草人徐环宇佟　艳王媛媛田雪莲徐　瑞乌日娜武俊瑞

范围

主要技术内容 4 原理采用三明治电化学免疫传感原理：工作电极表面固化捕获抗体，样品中致敏原与捕获抗体特异性结合，再与酶标检测抗体结合；酶催化底物产生电信号（电流/电位），信号强度与致敏原浓度正相关，通过标准曲线实现定性与半定量判定。 5 试剂与材料 5.1 牛奶致敏原（α-LA、β-LG）标准品：纯度≥95%。 5.2 捕获抗体、酶标检测抗体试剂盒：特异性满足附录A要求。 5.3 电化学底物液、洗涤液、封闭液、样品提取液。 5.4 标准工作液：用样品提取液将标准品逐级稀释为系列浓度（0.1 ng/mL～100 ng/mL）。 5.5 传感器工作电极：丝网印刷电极或金电极，符合GB/T 34098要求。 5.6 除非另有说明，仅使用分析纯试剂，实验用水符合GB/T 6682中一级水要求。 6仪器和设备 6.1 便携式电化学工作站/快速检测仪：具备恒电位、差分脉冲伏安法（DPV）/方波伏安法（SWV）检测功能。 6.2 分析天平：感量0.1 mg。 6.3 涡旋振荡器、高速离心机、微量移液器（10 μL～1000 μL）。 6.4 实验室常规器具。 7 样品制备 7.1 液态乳样品：摇匀后取5.0 mL，加入5.0 mL样品提取液，涡旋振荡2 min，静置5 min，取上清液待测。 7.2 冷藏/冷冻样品：冷藏样品恢复至室温；冷冻样品4℃解冻，避免反复冻融，按7.1处理。取 7.1 处理后的上清液，根据预期含量用样品提取液进行稀释后待测，使待测液浓度落入标准曲线线性范围内。 7.3 平行样：每份样品制备2份平行待测液。 8 分析步骤 8.1 电极预处理：按试剂盒要求活化工作电极。 8.2 固化与封闭：滴加捕获抗体，室温孵育；用封闭液封闭非特异性位点，洗涤。 8.3 结合反应：滴加样品待测液/标准液，室温孵育，洗涤；滴加酶标检测抗体，孵育，洗涤。 8.4 电化学检测：滴加底物液，设定参数（电位范围、扫描速率），记录电流信号值。 8.5 空白与对照：同步做试剂空白、阴性对照、阳性对照。 9 结果判定与表述 9.1 定性判定样品信号值＞阴性对照平均值+3倍标准差，判定检出阳性（+）；样品信号值≤阴性对照平均值+3倍标准差，判定未检出（-）。 9.2 半定量判定以标准品浓度为横坐标、信号值为纵坐标建立标准曲线，计算样品中致敏原浓度。 9.3 结果表述阳性：报告检出牛奶致敏原，并给出半定量结果（ng/mL）；阴性：报告未检出牛奶致敏原（低于检出限）；平行样相对偏差≤20%为有效，否则重测。 10 方法学性能指标 10.1 检出限（LOD）：α-LA≤0.1 ng/mL；β-LG≤0.1 ng/mL。 10.2 线性范围：0.1 ng/mL～100 ng/mL，相关系数R²≥0.99。 10.3 特异性：对大豆、花生、鸡蛋、麸质等无交叉反应，交叉反应率＜1%。 10.4 回收率：80%～120%。 10.5 精密度：批内相对标准偏差（RSD）≤15%，批间RSD≤20%。 10.6 检测时长：单样总时长≤30 min。 11 质量控制 11.1 每批次试验必须带阴性对照、阳性对照、空白对照。 11.2 标准曲线相关系数R²≥0.99方可使用。 11.3 回收率控制在80%～120%。 11.4 电极一次性使用，避免交叉污染。 11.5 检测环境：温度（23±2）℃，相对湿度（50±10）%RH。

适用范围

是否包含专利否

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