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江苏省林学会自我承诺

  江苏省林学会发布的T/JSF 009—2024《松材线虫RPA分子检测技术规程》团体标准遵循开放、公平、透明、协商一致和促进贸易和交流的原则,按照在本平台公布的《标准制定程序文件_JSF》制定。T/JSF 009—2024《松材线虫RPA分子检测技术规程》团体标准规定的内容符合国家有关法律法规和强制性标准的要求,没有侵犯他人合法权益。
  江苏省林学会在自愿基础上作出本承诺,并对以上承诺内容的真实性负责。

江苏省林学会
2024年07月26日

团体详细信息
团体名称 江苏省林学会
登记证号 51320000509155646T 发证机关 江苏省民政厅
业务范围 学术交流、科技应用
法定代表人/负责人 沈建辉
依托单位名称 江苏省林业科学研究院
通讯地址 南京市玄武区珠江路191号 邮编 : 210020
标准详细信息
标准状态   现行
标准编号   T/JSF 009—2024
中文标题   松材线虫RPA分子检测技术规程
英文标题   Technical code for RPA molecular detection of pine wood nematode
国际标准分类号   65.020.01 农业和林业综合
中国标准分类号   B 16
国民经济分类   A052 林业专业及辅助性活动
发布日期   2024年07月26日
实施日期   2024年07月26日
起草人   许嘉麟、贾玉娟、柴忠心、陈凤毛、董晓燕、徐福元、解春霞、查玉平、徐小文、蔡三山、董广平、尹华阳、杨静、李萍、雷舒、杨宸、孙凯、刘循、喻锦绣。
起草单位   南京生兴有害生物防治技术股份有限公司、南京林业大学、江苏省林业科学研究院、湖北省林业科学研究院、安徽省林业科学研究院、湖南省林业科学研究院、江西省林业有害生物防治检疫中心、贵州省森林病虫检疫防治站、湖南省林业有害生物防治检疫站、南京海关动植物与食品检测中心。
范围   本文件描述了松材线虫RPA分子检测、检测对象、检测流程、结果判定以及记录和归档的方法。 本文件适用于进出境植物检疫、国内植物检疫以及林业有害生物调查及其寄主植物和制品中携带松材线虫的分子检测鉴定工作。
主要技术内容   主要技术内容:
本技术的主旨是在恒温条件下实现松材线虫DNA的快速扩增,具体技术如下:
(1)样品的制备:采用贝尔曼分离法或快速分离器分离线虫,亦可采用电钻直接钻取木屑;
(2)样本DNA的提取:使用自主研发的提取试剂裂解样本,释放核酸;
(3)加入独家设计的特异的分子探针、引物及样本核酸;
(4)在ATP存在条件下,重组酶与引物结合形成蛋白-核酸复合物,并搜索配对的松材线虫DNA模板;
(5)重组酶离开引物,并在DNA聚合酶的作用下合成新的DNA链。同时,SSB与置换出的单链DNA结合;
(6)新合成的DNA链又可以作为模板进行下一轮扩增,从而实现指数式扩增;
(7)通过配套核酸荧光检测仪实时采集信号,绘制荧光信号-时间曲线,计算Ct值,然后根据样品Ct值的大小及曲线的形状自动判定结果。
创新点:
(1)目前市场上松材线虫检测时间平均在40分钟,此项技术大大缩短了松材线虫检测时间,在15分钟即可完成;
(2)整个扩增过程在恒温环境下完成,不需要高额的硬件设备,普适性高;
(3)检测准确,灵敏度可达10 copies/μl。
是否包含专利信息  
标准文本   不公开
标准公告
  标准发布公告 2024/7/26 15:14:05

*由江苏省林学会于2024/7/26 15:14:05在团体标准信息平台公布,最后修改时间:2024/7/26 15:14:05

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